簡(jiǎn)要描述:德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS 8 DIVE 光譜式多光子顯微鏡可無(wú)縫集成到共聚焦軟件界面中,提供快速且出色的導航功能 ,可輕松研究復雜樣本中的動(dòng)態(tài)過(guò)程。STELLARIS 8 DIVE——為您的研究提供各種可能性。
詳細介紹
品牌 | Leica/徠卡 | 產(chǎn)地類(lèi)別 | 進(jìn)口 |
---|---|---|---|
應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,生物產(chǎn)業(yè),綜合 | 應用方向 | 活體小動(dòng)物成像,雙光子成像,多光子成像 |
德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS 8 DIVE 光譜式多光子顯微鏡
多色多光子顯微鏡讓您更接近真像
多個(gè)不同熒光標記的組合越來(lái)越多地用于研究細胞和分子之間的動(dòng)態(tài)相互作用和空間關(guān)系。 目的是理解各種各樣復雜的生物事件,例如細胞連通性、細胞表型檢測、蛋白質(zhì) 相互作用或者蛋白共表達和共定位。 要將這類(lèi)研究擴大到整個(gè)器官或組織,需要合適的大體積多色顯微鏡學(xué)方法。 現在,DIVE 和 STELLARIS 相結合,為您提供靈活的多色多光子成像的強大性能。 而且,您還可以通過(guò)額外的無(wú)標記成像功能擴展實(shí)驗的潛力。
強大的在體分析能力,較之前提供更多細節
STELLARIS 8 DIVE 可為您提供深度超過(guò) 1 毫米的靈活多色成像。 使用 4Tune 光譜可調非退掃描檢測器,最多可同時(shí)定義四個(gè)檢測波段,或者在發(fā)射光譜中的任何區域先后成像時(shí)獲得無(wú)限數量的熒光團。 您可以根據所需的熒光團組合進(jìn)行靈活調節。 使用 STELLARIS 8 DIVE ,您可以通過(guò)超過(guò) 10 億個(gè)熒光團組合進(jìn)行多光子實(shí)驗,您能夠更詳細地研究復雜的過(guò)程,例如神經(jīng)元連通性、器官結構、動(dòng)態(tài)相互作用或者細胞和蛋白質(zhì)的空間關(guān)系。
利用 STELLARIS 8 DIVE,您可以通過(guò)四種或更多顏色研究活體樣本中的細胞轉移、區分相關(guān)蛋白、觀(guān)察清醒小鼠的海馬體活動(dòng)或者固定的厚腸切片的結構!
傳統的二向色鏡一直無(wú)法最佳區分所有熒光團,但是現在利用光譜探測器可以輕松地實(shí)現這一點(diǎn),因為我們可以真正做到為每個(gè)熒光團優(yōu)化您要探測的波長(cháng)。
荷蘭癌癥研究所(荷蘭阿姆斯特丹) Jacco van Rheenen 教授/博士。
活小鼠大腦皮層的神經(jīng)元(GFP,綠色)和小膠質(zhì)細胞(YFP,黃色)帶有遺傳標記,星形膠質(zhì)細胞通過(guò)磺酰羅丹明(藍色)標記,在尾靜脈中注射 Alexa680-Dextran 將血管染色(紅色)。 整體約 250 x 250 x 250 µm。 樣本由德國神經(jīng)退行性疾病研究中心光學(xué)顯微鏡設備部門(mén)(德國波恩)提供。
輕松使用 DIVE——4Tune 檢測器
4Tune 非退掃描檢測系統 可以配備 2 至 4 個(gè)檢測器,并且可自由配置混合檢測器 (Power HyD NDD)、光電倍增管 (PMT) 或將兩者結合使用。 發(fā)射光通過(guò)可變二向色鏡和帶通濾波器的組合方法分離。 在整個(gè)可見(jiàn)光光譜(380 - 800 納米)范圍內自由調節您的檢測范圍!
使用 4Tune 用戶(hù)界面,可以通過(guò)簡(jiǎn)單的拖放操作來(lái)優(yōu)化多個(gè)轉基因標志物的發(fā)射光設置。 用戶(hù)界面設計清晰直觀(guān),操作非常簡(jiǎn)單,幾乎無(wú)需培訓。
使用 STELLARIS 8 DIVE,您能夠為任何現有的和新開(kāi)發(fā)的轉基因標志物做好準備,而且可以適應未來(lái)的新發(fā)展!
上圖: 4Tune 非退掃描檢測系統: 1) 可變二向色鏡 (VD)。 2) 可變帶通 (VB)。 3) Power HyD NDD 或 PMT。 下圖: 直觀(guān)的 4Tune 用戶(hù)界面,可輕松設置 380 至 800 納米的所有顏色的檢測窗口。
深入探索新維度
使用 STELLARIS 8 DIVE,您能夠靈活調節實(shí)現更深層更細微觀(guān)察。 使用新型可變光路擴束鏡 (VBE),您可針對任何物鏡對所有激發(fā)光束進(jìn)行獨立優(yōu)化調節。
VBE 能夠根據您的研究問(wèn)題優(yōu)化共定位,并實(shí)現分辨率和深度之間的良好平衡。
小鼠大腦皮層,Thy1-eYFP。 使用“深度優(yōu)先"設置將穿透深度增加 20%。 IRAPO 25x1.0 W motCorr. 樣本由德國神經(jīng)退行性疾病研究中心光學(xué)顯微鏡設備部門(mén)(德國波恩)Kevin Keppler 提供。
使用可變光路擴束鏡優(yōu)化深度和分辨率
徠卡可變光路擴束鏡 (VBE) 將可調光束直徑與可調發(fā)散度相結合。 為您提供可調深度、分辨率和全色校正。
可調光束直徑可實(shí)現分辨率與深度之間的平衡優(yōu)化
STELLARIS 8 DIVE 能夠根據您的樣本要求進(jìn)行調節。 使用可變擴束鏡,您可以選擇: 優(yōu)化分辨率——光束充滿(mǎn)物鏡后孔徑,以及優(yōu)化穿透深度——光束直徑稍稍小于物鏡后孔徑。 后孔徑未充滿(mǎn)會(huì )使焦點(diǎn)體積增大、光程縮短,從而增大有效激發(fā)。
可調光束發(fā)散可實(shí)現全色校正
我們的 IR APO 物鏡在紅外波段上不會(huì )出現色差。 配備 STELLARIS 8 DIVE,您就可以使用適合紅外線(xiàn)以及多條紅外激光線(xiàn)的物鏡: 可變光路擴束鏡可用于校正色差,完成更實(shí)用的多色實(shí)驗。
可調式可變光路擴束鏡 (VBE)
通過(guò)無(wú)標記成像功能擴展體內深度實(shí)驗的潛力
膠原蛋白和彈性蛋白等分子在癌癥等疾病中起到相關(guān)作用。 我們的 4 tune 檢測器可使用二次和三次諧波產(chǎn)生信號,無(wú)需染色即可研究這些重要結構。
DIVE 與 STELLARIS 相結合,還可使用熒光固有的壽命信息。 借助這種能力,您可以通過(guò) NADH 或 FAD 的壽命成像進(jìn)行實(shí)驗,例如進(jìn)行樣本代謝繪圖。
五彩斑斕的小鼠小腸:膠原蛋白 1 顯示為灰色(無(wú)標記 SHG),譜系追蹤干細胞顯示為青色、綠色、黃色和紅色。干細胞在生物體內癌癥的傳播中發(fā)揮著(zhù)重要作用。樣品由荷蘭癌癥研究所的 Jacco van Rheenen 提供。
輕松在組織中導航,無(wú)需額外染色
在組織中導航通常需要使用導向標志來(lái)了解感興趣區域的位置。 膠原蛋白的支架特性有助于在組織中導航并找到感興趣區域,且無(wú)需復染。
大多數生物組織含有膠原蛋白,它是結締組織的主要成分。 例如,腸被一層膠原蛋白包裹。 通過(guò)精確采集 ? 激發(fā)波長(cháng)的發(fā)射信號,可以在多光子顯微鏡下輕松觀(guān)察膠原蛋白。 通過(guò) 4Tune 靈活的檢測窗口,可使用任何波長(cháng)采集這類(lèi)信號,無(wú)需額外的標記或工作。
一旦顯微鏡學(xué)家找到膠原蛋白結構,她就知道她感興趣的組織(這里是腸道干細胞)在附近了。
五彩斑斕的小鼠小腸:來(lái)自 SHG,灰色表示膠原蛋白 1,青色、綠色、黃色和紅色譜系示蹤干細胞。樣品由荷蘭癌癥研究所的 Jacco van Rheenen 提供。
將多光子成像和熒光壽命信息相結合,研究代謝變化
代謝變化可能是組織健康的重要標記。
STELLARIS 8 DIVE 可提供 TauSense 的所有優(yōu)勢,后者是一套基于熒光壽命的成像工具。 當細胞的代謝狀態(tài)發(fā)生變化時(shí),可通過(guò) NADH 等分子的熒光壽命變化來(lái)顯現出來(lái)。 NADH 在糖的新陳代謝中起到主要作用,其熒光壽命取決于葡萄糖濃度。 在引起葡萄糖分解的生物化學(xué)反應中會(huì )發(fā)生構象變化,這種變化會(huì )改變 NADH 熒光壽命。
STELLARIS 8 DIVE 可與 FAst Lifetime COntrast(FALCON)結合使用,進(jìn)行全定量熒光壽命分析。
被培養的 HeLa 細胞用葡萄糖處理前后的 NADH 自體熒光。 左:使用 TauContrast 的定性結果。 右:使用 FALCON 中的相量圖進(jìn)行的定量分析。
為多光子實(shí)驗增加額外維度
自發(fā)熒光是組織中內源性熒光團(例如 NADH 或 FAD 等小分子或組織結構)發(fā)射的自然熒光。 它在樣本成像時(shí)經(jīng)常會(huì )導致問(wèn)題。 但是,如果您能發(fā)揮它的優(yōu)勢呢?
現在,將 DIVE 和 TauSense 相結合,可以通過(guò)壽命信息進(jìn)行分離,從自發(fā)熒光信號中獲得有價(jià)值的信息。 這一功能為您提供了一個(gè)額外的渠道,從而能夠從寶貴的樣本中獲得更多信息。
使用 RapidClear 透明化處理的腎臟切片并使用多光子激發(fā)成像。第一個(gè)圖像是強度圖像,第二個(gè)是 TauContrast(850 nm 激發(fā)),第三個(gè)來(lái)自四個(gè)光譜通道,其中紅色表示血管(AF488,920 nm 激發(fā))、灰色表示膠原蛋白 (SHG)、綠色表示神經(jīng)細胞(SytoxOrange,1040 nm 激發(fā))和藍色表示色核(AF633,1100 nm 激發(fā))。由 SunJin 實(shí)驗室提供。
STELLARIS 的軟件功能提高工作效率
多光子系統通常使用嚴格,需要根據每個(gè)實(shí)驗和用戶(hù)進(jìn)行調整。 此外還有使用活體動(dòng)物或新移植組織工作的壓力,您很快就會(huì )了解進(jìn)行多光子實(shí)驗時(shí)功能靈活性帶來(lái)的優(yōu)勢。 STELLARIS 軟件中無(wú)縫集成了多光子功能,STELLARIS 8 DIVE 可為您提供涵蓋從實(shí)驗設置到最終結果的輕松、無(wú)憂(yōu)的工作流程。
使用 ImageCompass 順利設置實(shí)驗
使用 LAS X Navigator 在樣本上找到感興趣區域的直觀(guān)方法
通過(guò)動(dòng)態(tài)信號增強提高速度和分辨率
直徑 3.5 mm 的腸道切片,用 RapidClear 透明化并用 Navigator 成像:黑白:SHG – 膠原蛋白;藍色:Sytox Orange – 細胞核;綠色:Alexa 633 – 神經(jīng)細胞;紅色:Alexa 488 – 血管。由 SunJin 實(shí)驗室提供。
使用 ImageCompass 輕松快速設置多色多光子成像實(shí)驗
STELLARIS 8 DIVE 多光子硬件集成到 STELLARIS 的 ImageCompass 界面中,您可以輕松定義實(shí)驗設置,以便快速啟動(dòng)。
系統可利用范圍廣泛的熒光團數據庫自動(dòng)定義 MP 激發(fā)和發(fā)射。 您也可以點(diǎn)擊幾下鼠標進(jìn)行手動(dòng)定義。 按序設置以及快速預覽和 3D 查看器——多色多光子成像從未如此簡(jiǎn)單。
ImageCompass 可以控制 STELLARIS 8 DIVE 的硬件,并允許輕松定義實(shí)驗設置。
即時(shí)觀(guān)察重要細節,同時(shí)始終進(jìn)行樣本概覽
LAS X Navigator 是功能強大的導航工具,可讓您從逐個(gè)圖像的搜索方式快速轉變?yōu)椴榭凑麄€(gè)樣本概況的模式。 DIVE 和 STELLARIS 相結合,使您的多光子實(shí)驗效率更高。 獲益于在大型復雜樣本中自由導航的功能,通過(guò)快速概覽、多位置成像和區塊掃描獲得深度多色成像。
輕松獲得 1 厘米長(cháng)、0.5 毫米厚的腎臟切片的拼圖,并全面了解腎神經(jīng)細胞和膠原蛋白系統(此處與 TauContrast 結合使用)。
使用 LAS X Navigator 和 TauContrast 成像的腎臟切片(SunJin Labs,用 RapidClear 透明化)。整個(gè)切片尺寸為 10 x 7 mm,厚度為 500 µm。藍色的較短到達時(shí)間代表膠原蛋白(SHG 信號),而綠色的較長(cháng)值代表用 Alexa 633 染色的神經(jīng)細胞。
動(dòng)態(tài)信號增強:
保持體內快速生命過(guò)程的分辨率
活體樣本中的生命過(guò)程速度可能很快。 然而,動(dòng)物模型中的熒光信號往往比較弱。
動(dòng)態(tài)信號增強是應對這兩種挑戰的解決方案。 它可以使信號平均化,實(shí)現更佳信噪比,從而獲得更高的分辨率,同時(shí)還可適應樣本的動(dòng)態(tài)變化。
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